После оплодотворения яйцеклетки нуждаются в подращивании в специальных средах. За ними наблюдают на протяжении нескольких дней, а затем выбирают более качественные для подсадки.
Что такое культивирование в ЭКО?
Культивирование гамет и эмбрионов – это способ поддержания развития будущего эмбриона вне организма. Через 18 часов после соединения половых клеток определяют, произошло ли оплодотворение. Если результат положительный, яйцеклетки переносят на специальную среду, которая имитирует жидкость в просвете маточных труб.
Продолжительность культивирования может быть различной:
- «базовая» длительность составляет 3-4 дня;
- продолжительное культивирование – 5-6 дней.
Выбор срока культивирования зависит от различных факторов:
- оснащенность клиники;
- наличие специальных сред для пролонгированного культивирования;
- количество полученных зигот;
- состояние организма матери.
Если от женщины было получено мало яйцеклеток, а оплодотворилось 1-2, то используют перенос на 3 день.
Женщинам до 36 лет с 1 или 2 попыткой ЭКО рекомендуют выполнять подсадку одной бластоцисты на 5 день. Считается, что зародыш к 5 суткам более жизнеспособен, а состояние эндометрия оптимально для имплантации.
Среды для культивирования эмбрионов
До пересадки эмбриона в матку его растят в специальных условиях в инкубаторе. Каждый этап ЭКО протекает в своей среде, которая подобрана с учетом физиологии женского организма. Они стараются повторить процессы, происходящие в маточных трубах по мере продвижения по ним яйцеклетки. Среды для культивирования эмбриона отличаются по своим характеристикам:
- Среды для последовательного культивирования до 3 дня. Состав доказано повышает частоту дробления, имеет оптимальный уровень рН 7.2, что способствует улучшению показателей развития зародыша. Как результат – большее количество подходит для подсадки. Состоят такие среды из заменимых аминокислот, альбумина, витаминов, лактата кальция, практически не содержат глюкозу.
- Среды для культивирования до 5 дня содержит аминокислоты, большое количество глюкозы, фосфат, таурин и витамины. Концентрация веществ учитывает физиологические потребности бластоцисты.
- Единые среды подходят для всех этапов ЭКО – от оплодотворения до культивирования и подсадки эмбриона. Вероятность имплантации увеличивает добавление гиалуроновой кислоты.
Этапы развития эмбриона
В оплодотворенной яйцеклетке ежедневно происходят изменения.
На 1 день оценивается, произошло ли оплодотворение. Яйцеклетка считается оплодотворенной, если в ней различимы 2 пронуклеуса – генетический материал родителей. На этом этапе отбраковывают неподходящий материал:
- Если имело место оплодотворение двумя или тремя сперматозоидами;
- Незрелые яйцеклетки, в которых не произошло оплодотворение.
Перенос в этот период не выполняют по двум причинам:
- Яйцеклетка должна находиться в маточной трубе, а не в матке.
- Нет критериев для определения жизнеспособной качественной яйцеклетки.
На 2 день происходит дробление яйцеклетки с образованием двух бластомеров. Специалисты оценивают формы бластомеров, количества безъядерных частей. Чем их больше, тем ниже потенциал клетки на дальнейшее развитие. Пересадку в этот день выполняют только при получении 1-2 яйцеклеток.
На 3 день образуется уже до 8 бластомеров. Если есть какие-то аномалии, то развитие эмбриона прекращается само. В этот день уже возможно выполнение подсадки, но критерии оценки ненадежны в определении жизнеспособности.
На 4 день 16 бластомеров образуют морулу, в которой постепенно образуется полость. В физиологических условиях она попадает в матку. Пересадка в этот день дает хорошие результаты по приживаемости эмбриона.
На 5-6 день полость внутри морулы увеличивается до половины ее объема, она переходит в стадию бластоцисты. Клетки внутри нее располагаются слоями, которые дадут начало телу зародыша и оболочкам с плацентой. Бластоциста освобождается от блестящей оболочки, которая покрывала ее снаружи. С этого момента она способна прикрепляться к стенке матки.
Перенос эмбриона на 5-6 день увеличивает количество прижившихся зародышей и успешных беременностей. По статистике приживается каждый второй зародыш. Это дает возможность подсаживать меньшее число бластоцист, что снижает вероятность многоплодных беременностей.
Протоколы культивирования в ЭКО
Данные о развитии клеток по дням заносятся в виде специальных буквенно-цифровых обозначений в протокол культивирования эмбрионов. Расшифровка отражает состояние клеток, бластоцист. Оцениваются такие показатели:
- количество бластомеров по дням, день оплодотворения считают нулевым;
- процент фрагментации обозначают буквами;
- размер бластоцисты определяют по объему полости, присваивают номер от 1 до 6;
- две буквы обозначают качество клеточной массы бластоцисты, первая – внутреннего слоя, вторая – трофобласта;
Качество клеток определяется классом, где 1(А) – отлично, а последний 4(D) – неудовлетворительно. Эмбрионы 4 класса не используются для подсадки и криоконсервирования.
Когда культивирование невозможно?
Для культивирования эмбрионов противопоказаний нет, но при наличии следующих факторов не рекомендуется прибегать к ЭКО без предварительного лечения:
- миома;
- злокачественные опухоли;
- воспалительные или инфекционные процессы;
- обострение хронических заболеваний;
- отсутствие матки.
Метод подращивания эмбрионов повышает процент наступления беременностей. При выборе срока культивирования врач должен отталкиваться от состояния конкретной пациентки.
Юлия Шевченко, акушер-гинеколог, специально для Mirmam.pro
Отзывы о статье: Зачем нужно культивирование эмбрионов в ЭКО